標(biāo)準(zhǔn)解讀

《NY/T 553-2002 離體禽支原體病診斷技術(shù)》是一項(xiàng)針對(duì)禽類支原體疾病檢測(cè)方法的標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了用于診斷禽支原體感染的一系列實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)要求，旨在為獸醫(yī)、科研人員以及相關(guān)行業(yè)提供一套科學(xué)、準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。

標(biāo)準(zhǔn)中首先明確了適用范圍，即適用于雞、鴨等家禽支原體疾病的實(shí)驗(yàn)室診斷。接著對(duì)術(shù)語(yǔ)和定義進(jìn)行了界定，包括但不限于“支原體”、“分離培養(yǎng)”、“血清學(xué)試驗(yàn)”等關(guān)鍵概念，確保讀者能夠理解后續(xù)內(nèi)容的基礎(chǔ)知識(shí)。

在材料與試劑部分，《NY/T 553-2002》列出了進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè)所需的具體物品及其質(zhì)量要求，如培養(yǎng)基的選擇與制備、抗血清的質(zhì)量控制等。同時(shí)，對(duì)于樣品采集也有明確指導(dǎo)，強(qiáng)調(diào)了取樣部位、數(shù)量及保存條件的重要性，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性和可靠性。

方法部分是本標(biāo)準(zhǔn)的核心內(nèi)容之一，介紹了多種可用于禽支原體鑒定的技術(shù)手段，包括但不限于：

  • 分離培養(yǎng)法：通過(guò)特定條件下培養(yǎng)疑似感染動(dòng)物組織或分泌物中的支原體來(lái)實(shí)現(xiàn)直接觀察。
  • 血清學(xué)檢測(cè)：利用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）、凝集反應(yīng)等技術(shù)檢測(cè)待測(cè)樣本中是否存在針對(duì)特定支原體的抗體。
  • PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）：基于核酸擴(kuò)增原理快速準(zhǔn)確地識(shí)別目標(biāo)微生物DNA片段。

此外，《NY/T 553-2002》還特別指出了每種方法的操作步驟、注意事項(xiàng)以及結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，并提供了參考文獻(xiàn)供進(jìn)一步研究使用。

最后，在附錄中給出了某些特定情況下可能需要用到的數(shù)據(jù)表單模板或者補(bǔ)充說(shuō)明信息，幫助使用者更好地理解和執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)中的各項(xiàng)要求。


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  • 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替
  • 2002-08-27 頒布
  • 2002-12-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS.11.220B41NY中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T553-2002禽支原體病診斷技術(shù)DiagnostictechniquesforavianmycoplasmosisCmycoplasmagallisepticum2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T553—2002禽支原體?。╝vianmycoplasmosis）又稱雞敗血支原體（mycoplasmgalliscpticum.簡(jiǎn)稱MC），常引起雞的慢性呼吸道疾病。MG也可感染火雞，引起傳染性突炎。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織worldOrganizationforAnimalHealth(英）.OfficelnternationaldesEpizooties(法），IE將本病例B類動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為二類疫病。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法與（)E《診斷試驗(yàn)與疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)》推薦相應(yīng)方法一致。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧魯醫(yī)局提出本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸門(mén)，本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：農(nóng)業(yè)部動(dòng)物檢疫所。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：鄲福生、尹燕博、蔣正軍、孫淑芳、陸明哲、龔振華。

NY/T553—2002禽支原體病診斷技術(shù)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了禽支原體(MG)分離鑒定和快速血消凝集試驗(yàn)(RSA)的技術(shù)要求本標(biāo)準(zhǔn)適用于雞和火雞及其產(chǎn)品MG的檢測(cè)。禽支原體的分商和鑒定2.1材料準(zhǔn)備2.1.1培養(yǎng)基制備見(jiàn)附錄A(規(guī)范性附歡)。2.1.2免抗MG附性血清和抗免熒光抗體結(jié)合物2.2分商2.2.1采樣活禽從鼻腔、食管、氣管、泄殖腔和交合器中取樣。死禽從鼻腔、眶下突、氣管或氣囊采樣.也可吸取眶下突和關(guān)節(jié)滲出物或結(jié)膜囊內(nèi)沖洗物。對(duì)于雞豚從卵黃囊內(nèi)衣面、口咽和氣囊采樣。2.2.2樣品的處理采樣后應(yīng)盡快培養(yǎng)。如須運(yùn)輸，小塊組織貿(mào)于支原體培養(yǎng)基中.執(zhí)子在培養(yǎng)基中用力攪拌數(shù)次，將培養(yǎng)基運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室盡快培養(yǎng)。2.2.3接種將樣品0.2ml.接種于1.8ml.支原體液體培養(yǎng)基中，依次10倍稀釋至10.密封.37（培養(yǎng)。同時(shí)將樣品接種于支原體固體培養(yǎng)基中，置于含5%～10%二氧化碳((（)。)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2.2.3.1每天檢查液體培養(yǎng)基酸堿度，一旦發(fā)現(xiàn)pH值變化，立即接種于固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。若培養(yǎng)基酸堿度沒(méi)有變化，每隔3d～5d盲傳一代，共傳3代，培養(yǎng)10d后接種于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2.2.3.2因體培芥基上若有菌落生長(zhǎng)，用低倍顯微鏡觀察菌落.可見(jiàn)中央突起呈荷包蛋樣(有時(shí)不典型）而進(jìn)一步作血清學(xué)鑒定。2.3鑒定2.3.1用間接光抗體試驗(yàn)(IFA)鑒定MG。取1.0cm～1.5m的瓊脂塊，苗著面朝上置于載玻片上，第一塊載玻片上放一塊待檢分離物、一塊已知MG菌落(S?；騌株)、塊已知其他支原體菌落，第二塊載玻片上放一塊待檢分離物。2.3.2第一塊載玻片上每塊瓊脂塊上加一滴適當(dāng)稀釋的兔抗MG血清，第二塊載玻片上瓊脂塊上加一滴正常免血清。2.3.3瓊脂塊在濕盒中室溫條件下反應(yīng)30min后，分別放到含有磷酸鹽緩沖液(PBS)(pH7.2)的不同器血中，沖洗10min，共沖洗2次。2.3.4將瓊脂塊放回原玻片，吸水紙吸取過(guò)多的水分，每塊瓊脂加上稀釋好的抗免熒光抗體結(jié)合物，反應(yīng)、洗滌同前，最后將瓊脂塊放回玻片，吸干多余水分后于人射式熒光顯微鏡下檢查結(jié)果。2.4結(jié)果判定菌落呈現(xiàn)亮綠色熒光時(shí)為陽(yáng)性反應(yīng)，若僅有暗淡的菌落輪魔,與

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