標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 40255-2021 對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程 PCR檢測法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn)，專門針對對蝦肝胰腺細(xì)小病毒（HPV）的診斷提供了一套基于PCR技術(shù)的方法。該標(biāo)準(zhǔn)適用于對蝦養(yǎng)殖過程中疑似感染HPV病例的確診以及相關(guān)研究。

在本標(biāo)準(zhǔn)中，首先明確了實(shí)驗(yàn)所需材料與試劑，包括但不限于DNA提取試劑盒、特異性引物、Taq酶等，并且強(qiáng)調(diào)了這些試劑的質(zhì)量要求，以保證后續(xù)操作能夠順利進(jìn)行并得到準(zhǔn)確的結(jié)果。對于樣品采集方面，則詳細(xì)描述了從活體或冷凍保存狀態(tài)下的對蝦中獲取組織樣本的具體步驟，推薦使用肝胰腺作為主要檢測部位，因?yàn)檫@是病毒最易累積的地方之一。

接著，標(biāo)準(zhǔn)給出了詳細(xì)的DNA提取流程，采用商業(yè)化試劑盒結(jié)合特定的操作指南來完成這一過程。之后是PCR反應(yīng)體系建立部分，這里不僅列出了各種成分如模板DNA、上下游引物、dNTPs等的具體用量，還規(guī)定了擴(kuò)增條件，比如預(yù)變性溫度時間、循環(huán)次數(shù)及每個循環(huán)中的退火延伸參數(shù)等。通過優(yōu)化這些參數(shù)設(shè)置，可以大大提高目標(biāo)片段的擴(kuò)增效率和特異性。

此外，《GB/T 40255-2021》還特別提到了結(jié)果分析方法，即如何根據(jù)電泳圖譜判斷是否存在陽性信號，以及如何處理可能出現(xiàn)的假陰性或假陽性情況。同時，為了確保整個檢測過程的有效性和可靠性，標(biāo)準(zhǔn)還設(shè)置了內(nèi)部對照實(shí)驗(yàn)，用以監(jiān)控每批次實(shí)驗(yàn)的一致性和準(zhǔn)確性。

最后，在質(zhì)量控制章節(jié)里，標(biāo)準(zhǔn)提出了關(guān)于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、人員培訓(xùn)、儀器校準(zhǔn)等方面的要求，這些都是保障檢測結(jié)果真實(shí)可靠不可或缺的因素。通過遵循這套標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程，科研人員和水產(chǎn)養(yǎng)殖從業(yè)者能夠更加高效準(zhǔn)確地識別出受HPV感染的對蝦個體，從而采取相應(yīng)措施減少疾病傳播風(fēng)險。


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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2021-05-21 頒布
  • 2021-12-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
GB/T 40255-2021對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程PCR檢測法_第1頁
GB/T 40255-2021對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程PCR檢測法_第2頁
GB/T 40255-2021對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程PCR檢測法_第3頁
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GB/T 40255-2021對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程PCR檢測法-免費(fèi)下載試讀頁

文檔簡介

ICS6502030

CCSB.41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T40255—2021

對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程

PCR檢測法

Codeofdiagnosisforinfectionwithhepatopancreaticparvovirusof

penaeidshrimp—PCRmethod

2021-05-21發(fā)布2021-12-01實(shí)施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T40255—2021

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任

。。

本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本文件由全國水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC156)。

本文件起草單位中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站

:、。

本文件主要起草人楊冰萬曉媛黃倢余衛(wèi)忠史成銀張鋒宋曉玲李清張慶利許華李晨

:、、、、、、、、、、、

劉莉

。

Ⅰ

GB/T40255—2021

對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程

PCR檢測法

1范圍

本文件規(guī)定了對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病診斷規(guī)程中普遍適用的核酸檢測技術(shù)的要求針對肝胰腺細(xì)

,

小病毒給出了檢測法所需試劑或材料儀器設(shè)備樣品試

(Hepatopancreaticparvovirus,HPV),PCR、、、

驗(yàn)步驟和結(jié)果判定

。

本文件適用于對蝦各生活期樣品中帶毒情況的定性檢測以進(jìn)行對蝦肝胰腺細(xì)小病毒病的

HPV,

流行病學(xué)調(diào)查診斷檢疫和監(jiān)測

、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

白斑綜合征診斷規(guī)程第部分組織病理學(xué)診斷法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

堿基對

bp:(basepair)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙錠

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

鹽酸

HCl:(hydrogenchloride)

肝胰腺細(xì)小病毒

HPV:(hepatopancreaticparvovirus)

氫氧化鈉

NaOH:(sodiumhydroxide)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(polymerasechainreaction)

十二烷基硫酸

SDS:(sodiumdodecylsulfate)

Ta水生棲熱菌thermusauaticus

q:(q)

鹽酸和緩沖液

TE:TrisED

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