ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T33120—2016

梨皰狀潰瘍類病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPearblistercankerviroid

2016-10-13發(fā)布2017-05-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T33120—2016

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)湖北出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)中山出入境檢驗(yàn)檢疫

:、

局中華人民共和國(guó)新疆出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)云南出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)

、、、

山東出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人王振華陳定虎葉蕓徐文興徐家文曾憲東徐雪張永江王翀李旻王英超

:、、、、、、、、、、、

吳興海

。

Ⅰ

GB/T33120—2016

梨皰狀潰瘍類病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了梨皰狀潰瘍類病毒的檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境梨樹種苗組培苗及植株中梨皰狀潰瘍類病毒的檢疫和鑒定

、。

2梨皰狀潰瘍類病毒基本信息

學(xué)名Pearblistercankerviroid

:。

縮寫

:PBCVd。

異名梨泡斑類病毒

:。

分類地位馬鈴薯紡錘塊莖類病毒科Posiviroidae蘋果銹皮類病毒屬Ascaviroid

:(p),(p)。

傳播途徑通過(guò)嫁接芽接和刀具機(jī)械傳播但沒(méi)有有關(guān)介體及種子傳毒的報(bào)道遠(yuǎn)距離通過(guò)種苗

:、,。

調(diào)運(yùn)傳播

。

梨皰狀潰瘍類病毒的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

根據(jù)梨皰狀潰瘍類病毒全長(zhǎng)核酸鏈中的保守區(qū)域設(shè)計(jì)了一對(duì)擴(kuò)增該類病毒全長(zhǎng)核酸的引

RNA

物進(jìn)行擴(kuò)增和序列測(cè)定根據(jù)梨皰狀潰瘍類病毒全長(zhǎng)核酸序列設(shè)計(jì)與正單鏈互補(bǔ)的單

,RT-PCR;RNA

鏈探針通過(guò)雜交信號(hào)強(qiáng)弱進(jìn)行結(jié)果判定

RNA,。

4儀器設(shè)備和主要試劑

41儀器設(shè)備

.

超凈工作臺(tái)滅菌鍋制冰機(jī)高速冷凍離心機(jī)超低溫冰箱常規(guī)冰箱渦旋振蕩器微量進(jìn)樣器垂

、、、、、、、、

直電泳槽儀凝膠成像系統(tǒng)雜交爐交聯(lián)儀雜交管化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀等

、PCR、、、、、。

42主要試劑

.

除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純?cè)噭┮姼戒浄肿与s交試劑見附錄

,。RT-PCRB;C。

5癥狀觀察

取樣品量若樣品少可適量增大比例的種苗進(jìn)行檢查檢查梨皰狀潰瘍類病毒侵染癥

1%~5%()。

狀樹皮上形成皰狀物或樹皮開裂