掃描電子顯微鏡樣品制備1常規(guī)樣品制備技術(shù)2冷凍割斷技術(shù)3離子蝕刻技術(shù)4鑄型技術(shù)5聚焦離子束技術(shù)掃描電子顯微鏡樣品制備1常規(guī)樣品制備技術(shù)1掃描電鏡是研究樣品的表面結(jié)構(gòu)，要求樣品的表面不變形、無(wú)污染、導(dǎo)電好、干燥好，結(jié)構(gòu)清晰、無(wú)損壞。對(duì)于金屬樣品或較硬的組織來(lái)說(shuō)樣品處理比較簡(jiǎn)單。對(duì)于生物的軟組織來(lái)說(shuō)，就需要進(jìn)行較為復(fù)雜的樣品處理過(guò)程。下面主要介紹生物組織的樣品制備技術(shù)。掃描電鏡是研究樣品的表面結(jié)構(gòu)，2生物樣品的常規(guī)處理方法1取材2表面結(jié)構(gòu)的清洗、暴露3組織固定4組織脫水5組織干燥6組織表面導(dǎo)電處理7組織干燥保存生物樣品的常規(guī)處理方法1取材3取材取材速度要快，刀片要鋒利，避免組織擠壓，將要觀察的區(qū)域用刀片切開(kāi)暴露，組織塊可大至40×40×10mm3,一般5×5×3mm3為宜。取材4清洗對(duì)要觀察的組織表面用緩沖液或生理鹽水進(jìn)行快速?zèng)_洗，除掉表面的粘液、組織液、血液等附著物，盡量將組織表面清洗干凈，以利于電鏡觀察。對(duì)于載玻片上的培養(yǎng)細(xì)胞要注意沖洗力量，防止細(xì)胞脫落。對(duì)于難以沖掉的附著物，也可在固定后仔細(xì)沖洗。清洗5固定將清洗好的組織迅速放入2%戊二醛固定液中2小時(shí)，0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘，然后放入1%的鋨酸中后固定液1小時(shí)，0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘。固定64組織脫水固定好的組織清洗后用酒精或丙酮進(jìn)行梯度脫水，30%，50%，70%，90%，100%各15分鐘。4組織脫水固定好的組織清洗后用75組織干燥臨界點(diǎn)干燥法：中間液，液態(tài)二氧化碳，加壓，升溫，真空干燥。冰凍干燥法：乙醚，液氮冷凍，真空干燥。

乙腈真空干燥法：脫水后的組織進(jìn)行50%，70%，90%，100%乙腈置換，各15分鐘，然后放入真空鍍膜臺(tái)的鐘罩中真空干燥5組織干燥臨界點(diǎn)干燥法：中間液，液態(tài)二氧化碳，加壓，86導(dǎo)電處理真空蒸鍍金屬膜：離子鍍膜（濺射鍍膜）：6導(dǎo)電處理真空蒸鍍金屬膜：9其他樣品制備方法1冷凍割斷法：離子蝕刻法：鑄型技術(shù)：離子聚焦束IFB其他樣品制備方法1冷凍割斷法：10掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件11掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件12掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件13冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮14掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件15掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件16掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件17掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件18耳蝸毛細(xì)胞耳蝸毛細(xì)胞19掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件20掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件21掃描電子顯微鏡樣品制備1常規(guī)樣品制備技術(shù)2冷凍割斷技術(shù)3離子蝕刻技術(shù)4鑄型技術(shù)5聚焦離子束技術(shù)掃描電子顯微鏡樣品制備1常規(guī)樣品制備技術(shù)22掃描電鏡是研究樣品的表面結(jié)構(gòu)，要求樣品的表面不變形、無(wú)污染、導(dǎo)電好、干燥好，結(jié)構(gòu)清晰、無(wú)損壞。對(duì)于金屬樣品或較硬的組織來(lái)說(shuō)樣品處理比較簡(jiǎn)單。對(duì)于生物的軟組織來(lái)說(shuō)，就需要進(jìn)行較為復(fù)雜的樣品處理過(guò)程。下面主要介紹生物組織的樣品制備技術(shù)。掃描電鏡是研究樣品的表面結(jié)構(gòu)，23生物樣品的常規(guī)處理方法1取材2表面結(jié)構(gòu)的清洗、暴露3組織固定4組織脫水5組織干燥6組織表面導(dǎo)電處理7組織干燥保存生物樣品的常規(guī)處理方法1取材24取材取材速度要快，刀片要鋒利，避免組織擠壓，將要觀察的區(qū)域用刀片切開(kāi)暴露，組織塊可大至40×40×10mm3,一般5×5×3mm3為宜。取材25清洗對(duì)要觀察的組織表面用緩沖液或生理鹽水進(jìn)行快速?zèng)_洗，除掉表面的粘液、組織液、血液等附著物，盡量將組織表面清洗干凈，以利于電鏡觀察。對(duì)于載玻片上的培養(yǎng)細(xì)胞要注意沖洗力量，防止細(xì)胞脫落。對(duì)于難以沖掉的附著物，也可在固定后仔細(xì)沖洗。清洗26固定將清洗好的組織迅速放入2%戊二醛固定液中2小時(shí)，0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘，然后放入1%的鋨酸中后固定液1小時(shí)，0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘。固定274組織脫水固定好的組織清洗后用酒精或丙酮進(jìn)行梯度脫水，30%，50%，70%，90%，100%各15分鐘。4組織脫水固定好的組織清洗后用285組織干燥臨界點(diǎn)干燥法：中間液，液態(tài)二氧化碳，加壓，升溫，真空干燥。冰凍干燥法：乙醚，液氮冷凍，真空干燥。

乙腈真空干燥法：脫水后的組織進(jìn)行50%，70%，90%，100%乙腈置換，各15分鐘，然后放入真空鍍膜臺(tái)的鐘罩中真空干燥5組織干燥臨界點(diǎn)干燥法：中間液，液態(tài)二氧化碳，加壓，296導(dǎo)電處理真空蒸鍍金屬膜：離子鍍膜（濺射鍍膜）：6導(dǎo)電處理真空蒸鍍金屬膜：30其他樣品制備方法1冷凍割斷法：離子蝕刻法：鑄型技術(shù)：離子聚焦束IFB其他樣品制備方法1冷凍割斷法：31掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件32掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件33掃描電鏡樣品制備技術(shù)教學(xué)課件34冠狀動(dòng)