1、 4 1NY 50702022無公害食品 水產(chǎn)品中漁藥殘留限量范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了無公害水產(chǎn)品中漁藥及通過環(huán)境污染造成的藥物殘留的最高限量。本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖品及初級加工水產(chǎn)品、冷凍水產(chǎn)品，其他水產(chǎn)加工品可以參照使用。標(biāo)準(zhǔn)性引用文件以下文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。但凡注日期的引用文件，其 隨后全部的修改單不包括訂正的內(nèi)容或均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓舞依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方爭辯是否可使用這些文件的最版本。但凡不注日期的引用文件，其最 版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。NY 50292022無公害食品 豬肉NY 5071無公害食品 漁用藥物使用準(zhǔn)則SC/T 33031997凍烤鰻SN/T 01

2、971993出口肉中喹乙醇?xì)埩袅繖z驗方法SN 02061993出口活鰻魚中噁喹酸殘留量檢驗方法SN 02081993出口肉中十種磺胺殘留量檢驗方法SN 05301996出口肉品中呋喃唑酮?dú)埩袅康臋z驗方法 液相色譜法術(shù)語和定義以下術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1漁用藥物fishery drugs用以預(yù)防、把握和治療水產(chǎn)動、植物的病、蟲、害，促進(jìn)養(yǎng)殖品種安康生長，增加機(jī)體抗病力量以及改善養(yǎng)殖水體質(zhì)量的一切物質(zhì)，簡稱“漁藥”。3.2漁藥殘留 residues of fishery drugs在水產(chǎn)品的任何食用局部中漁藥的原型化合物或/和其代謝產(chǎn)物，并包括與藥物本體有關(guān)雜質(zhì)的殘留。3.3最高殘留限量 m

3、aximum residue Limit,MRL允許存在于水產(chǎn)品外表或內(nèi)部主要指肉與皮或/和性腺的該藥或標(biāo)志殘留物的最高量/濃度以鮮重計，表示為： g/kg 或 mg/kg。要求漁藥使用水產(chǎn)養(yǎng)殖中制止使用國家、行業(yè)公布的禁用藥物，漁藥使用時按 NY 5071 的要求進(jìn)展。水產(chǎn)品中漁藥殘留限量要求水產(chǎn)品中漁藥殘留限量要求見表 1。藥物名稱藥物類別四環(huán)素類抗生素類氯霉素類磺胺類及增效劑喹諾酮類 硝基呋喃類其他中文金霉素土霉素 四環(huán)素 氯霉素 磺胺嘧啶磺胺甲基嘧啶 磺胺二甲基嘧啶磺胺甲噁唑甲氧芐啶噁喹酸 呋喃唑酮己烯雌酚喹乙醇英文chlortetracycline Oxytetracycline T

4、etracycline Chloramphenicol Sulfadiazine Sulfamerazine Sulfadimidine sulfamethoxazole Trimethoprim Oxilinic acid Furazolidone DiethylstilbestrolOlaquindox指標(biāo)MPL/ g/kg100100100不得檢出100以總量計50300不得檢出不得檢出不得檢出表 1水產(chǎn)品中漁藥殘留限量檢測方法金霉素、土霉素、四環(huán)霉金霉素測定按NY 50292022 中附錄B 規(guī)定執(zhí)行，土霉素、四環(huán)素按 SC/T 33031997中附錄A 規(guī)定執(zhí)行。氯霉素氯霉素殘留量的

5、篩選測定方法按本標(biāo)準(zhǔn)中附錄A 執(zhí)行，測定按NY 50292022 中附錄D氣相色譜法的規(guī)定執(zhí)行?；前奉惢前奉愔械幕前芳谆奏ぁ⒒前范谆奏さ臏y定按 SC/T 3303 的規(guī)定執(zhí)行，其他磺胺類按 SN/T 0208 的規(guī)定執(zhí)行。噁喹酸噁喹酸的測定按SN/T 0206 的規(guī)定執(zhí)行。呋喃唑酮呋喃唑酮的測定按SN/T 0530 的規(guī)定執(zhí)行。己烯雌酚己烯雌酚殘留量的篩選測定方法按本標(biāo)準(zhǔn)中附錄B 規(guī)定執(zhí)行。喹乙醇喹乙醇的測定按SN/T 0197 的規(guī)定執(zhí)行。檢驗規(guī)章檢驗工程按相應(yīng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定工程進(jìn)展。抽樣組批規(guī)章同一水產(chǎn)養(yǎng)殖場內(nèi)，在品種、養(yǎng)殖時間、養(yǎng)殖方式根本一樣的養(yǎng)殖水產(chǎn)品為一批同一養(yǎng)殖池，或多個養(yǎng)

6、殖池；水產(chǎn)加工品按批號抽樣，在原料及生產(chǎn)條件根本一樣下同一天或同一班組生產(chǎn)的產(chǎn)品為一批。抽樣方法養(yǎng)殖水產(chǎn)品隨機(jī)從各養(yǎng)殖池抽取有代表性的樣品，取樣量見表2。表 2取樣量生物數(shù)量/尾、只取樣量/尾、只500 以內(nèi)25001 00041 0015 000105 00110 0002010 00130水產(chǎn)加工品每批抽取樣本以箱為單位，100 箱以內(nèi)取 3 箱，以后每增加 100 箱包括缺乏 100 箱 則抽 1 箱。按所取樣本從每箱內(nèi)各抽取樣品不少于3 件，每批取樣量不少于 10 件。取樣的樣品的處理采集的樣品應(yīng)分成兩等份，其中一份作為留樣。從樣本中取有代表性的樣品，裝入適當(dāng) 容器，并保證每份樣品都能

7、滿足分析的要求；樣品的處理按規(guī)定的方法進(jìn)展，通過細(xì)切、絞肉機(jī)絞碎、縮分，使其混合均勻；魚、蝦、貝、藻等各類樣品量不少于200 g。各類樣品的處理方法如下：魚類：先將魚體外表雜質(zhì)洗凈，去掉鱗、內(nèi)臟，取肉包括脊背和腹部肉和皮一起絞碎，特別要求除外。龜鱉類：去頭、放出血液，取其肌肉包括裙邊，絞碎后進(jìn)展測定。 c蝦類：洗凈后，去頭、殼，取其肌肉進(jìn)展測定。 d貝類：鮮的、冷凍的牡蠣、蛤蜊等要把肉和體液調(diào)制均勻后進(jìn)展分析測定。e蟹：取肉和性腺進(jìn)展測定。 f混勻的樣品，如不準(zhǔn)時分析，應(yīng)置于清潔、密閉的玻璃容器，冰凍保存。判定規(guī)章按不同產(chǎn)品的要求所檢的漁藥殘留各指標(biāo)均應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)的要求，各項指標(biāo)中的極限值承受

8、修約值比較法。超過限量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定時，允許加倍抽樣將此項指標(biāo)復(fù)驗一次，按復(fù)驗結(jié)果判定本批產(chǎn)品是否合格。經(jīng)復(fù)檢后所檢指標(biāo)仍不合格的產(chǎn)品則判為不合格品。附 錄A標(biāo)準(zhǔn)性附錄氯霉素殘留的酶聯(lián)免疫測定法適用范圍本方法適用于測定水產(chǎn)品肌肉組織中氯霉素的殘留量。原理利用抗體抗原反響。微孔板包被有針對兔免疫球蛋白IgG氯霉素抗體的羊抗體，參加氯霉素抗體、氯霉素標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)和樣品溶液。游離氯霉素與氯霉素酶標(biāo)記物競爭氯霉 素抗體，同時氯霉素抗體與羊抗體連接。沒有連接的酶標(biāo)記物在洗滌步驟中被洗去。將酶基 質(zhì)過氧化尿素和發(fā)色劑四甲基聯(lián)苯胺參加到孔中并孵育；結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化成藍(lán)色的產(chǎn)物。參加反響停頓液后使顏

9、色由藍(lán)變?yōu)辄S，在450 nm 處測量，吸光 度與樣品的氯霉素濃度成反比。檢測限篩選方法的檢測下限為 1g/kg。儀器離心機(jī)。微孔酶標(biāo)儀450 nm。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀?；旌掀鳌Ｒ埔浩?。A.4.650L，100L，450L 微量加液器等。藥品和試劑除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當(dāng)純度的水。乙酸乙酯。乙腈。正己烷。磷酸鹽緩沖液PBSpH7.2：0.55 g 磷酸二氫鈉NaH2PO4H2O，2.85 g 磷酸氫二鈉Na2HPO42H2O，9 g 氯化鈉NaCl參加蒸餾水至 1 000 mL。標(biāo)準(zhǔn)溶液分別取標(biāo)準(zhǔn)濃縮液 50 L 用 450 L 緩沖液 1試劑盒供給稀釋并混

10、均勻，制成 0、50 ng/L、50 ng/L、450 ng/L、1 350 ng/L、4 050 ng/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。樣品提取和純化取 5.0 g 粉碎的魚肉樣品樣品先去脂肪組織，與20 mL 乙腈水溶液86+16混合 10 min,15離心 10 min4 000r/min。取 3 mL 上清液與 3 mL 蒸餾水混合，參加 4.5 mL 乙酸乙酯混合 10 min，15離心10 min4 000r/min。將乙酸乙酯層轉(zhuǎn)移至另一瓶中連續(xù)枯燥，用1.5 mL 緩沖液 1 溶液枯燥的殘留物，參加 1.5 mL 正己烷混合。完全除去正己烷層上層，取 50L 水箱進(jìn)展分析。樣品測定程序?qū)⒆銐驑?biāo)

11、準(zhǔn)和樣品所用數(shù)量的孔條插入微孔架，記錄下標(biāo)準(zhǔn)和樣品的位置，每一樣品和標(biāo)準(zhǔn)做兩個平行試驗。參加 50L 稀釋了的酶標(biāo)記物到微孔底部，再參加50L 的標(biāo)準(zhǔn)或處理好的樣品液到各自的微孔中。參加 50L 稀釋了的抗體溶液到每一個微孔底部充分混合，在室溫孵育2 h。倒出孔中的液體，將微孔架倒置在吸水紙上拍打每行拍打 3 次以保證完全除去孔中的液體，然后用 250L 蒸餾水充入孔中，再次倒掉微孔中的液體，再重復(fù)操作兩次。參加 50L 基質(zhì)、50L 發(fā)色試劑到微孔中，充分混合并在室溫、暗處孵育30 min。參加 100L 反響停頓液到微孔中，混合好，以空氣為空白，在450 nm 處測量吸光度值留意：必需在參

12、加反響停頓液后60 min 內(nèi)讀取吸光度值。結(jié)果所獲得的標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸光度值的平均值除以第一個標(biāo)準(zhǔn) 0 標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值再乘以100，得到以百分比給出的吸光度值，以式A.1表示：A式中：E吸光度值，%； A標(biāo)準(zhǔn)或樣品的吸光度值； A00 標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值。E(%) A 100A.10以計算的標(biāo)準(zhǔn)值繪成一個對應(yīng)氯霉素濃度ng/L的半對數(shù)坐標(biāo)系統(tǒng)曲線圖，校正的曲線在 50 ng/L1 350 ng/L 的范圍內(nèi)應(yīng)成為線性，相對應(yīng)的每一個樣品的濃度，可以從曲線上讀出。乘出稀釋倍數(shù)即可得到樣品中氯霉素的實(shí)際濃度ng/kg。附 錄 B標(biāo)準(zhǔn)性附錄己烯雌酚DES殘留的酶聯(lián)免疫測定法適用范圍本方法適用于測定水產(chǎn)品肌

13、肉等可食組織中己烯雌酚的殘留量。原理測定的根底是利用抗體抗原反響。微孔板包被有針對兔IgGDES 抗體的羊抗體，參加 DES 抗、標(biāo)準(zhǔn)和樣品溶液。DES 與 DES 抗體連接，同時DES 抗體與羊抗體連接。洗滌 步驟后，參加DES 酶標(biāo)記物，DES 酶標(biāo)記物與孔中未結(jié)合的DES 抗體結(jié)合，然后在洗滌步 驟中除去未結(jié)合的DES 酶標(biāo)記物。將酶基質(zhì)和發(fā)色劑四甲基聯(lián)苯胺參加到孔中并孵育； 結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物。參加反響停頓液后使顏色由藍(lán)變?yōu)辄S， 在 450 nm 處沒量，吸光度與樣品的己烯雌酚濃度成反比。檢測限己烯雌酚檢測的下限為 1g/kg。儀器微孔酶標(biāo)儀450 nm。離心

14、機(jī)。37恒溫箱。移液器。B.4.550L，100L，450L 微量加液器。B.4.6RIDA C18 柱等。試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當(dāng)純度的水。叔丁基甲基醚。石油醚。二氯甲烷。6 mol/L 磷酸。乙酸鈉緩沖液等。供給的 DES 標(biāo)準(zhǔn)液為直接使用液，濃度為 0、12.5109mol/L、25109mol/L、50109mol/L、100109mol/L、200109mol/L。樣品處理取 5.0 g 肌肉除去脂肪組織，用 10 mL pH 為 7.2 的 67 m mol/L 磷酸緩沖液研磨后， 用 8 mL 叔丁基甲基醚提取研磨物，猛

15、烈振蕩20 min；離心10 min4 000 r/min；移去上清液，用 8 mL 叔丁基甲基醚重復(fù)提取沉淀物。將兩次提取的醚相合并，并且蒸發(fā)；用 1 mL 甲醇70%溶解枯燥的殘留物；用 3 mL石油醚洗滌甲醇溶液研磨 15 s，短時間離心，吸除石油醚。蒸發(fā)甲醇溶液，用 1 mL 二氯甲烷溶解后，再用 3 mL 1 mol/L 的氫氧化鈉NaOH 溶液提取；然后 300 L 6 mol/L 磷酸中和提取液，用RIDA C18 柱進(jìn)展純化。測定程序室溫 2024條件下操作將足夠標(biāo)準(zhǔn)和樣品所用數(shù)量的孔條插入微孔架，標(biāo)準(zhǔn)和樣品做兩個平行試驗，記錄下標(biāo)準(zhǔn)和樣品的位置。參加 20L 的標(biāo)準(zhǔn)和處理好的

16、樣品到各自的微孔中，標(biāo)準(zhǔn)和樣品做兩個平行試驗。參加 50L 稀釋后的DES 抗體到每一個微孔中，充分混合并在 28孵育過夜留意：在其次早上連續(xù)進(jìn)展試驗之前，微孔板應(yīng)在室溫下放置30 min 以上，稀釋用緩沖液也應(yīng)回到室溫，因此最好將緩沖液放在室溫下過夜。倒出孔中的液體，將微孔架倒置在吸水紙上拍打每行拍打 3 次以保證完全除去孔中的液體，用 250L 蒸餾水充入孔中，再次倒掉微孔中液體，再重復(fù)操作兩次。參加 5L 稀釋的酶標(biāo)記物到微孔底部，室溫孵育 1 h。倒出孔中的液體，將微孔架倒置在吸水紙上拍打每次拍打 3 次以保證完全除去孔中的液體，用 250L 蒸餾水充入孔中，再次倒掉微孔中液體，再重復(fù)操作一次。參加 50L 基質(zhì)和 50L 發(fā)色試劑到微孔中，充分混合并在室溫暗處孵育15 min。參加 100L 反響停頓液到微孔中，混合好在 450 nm 處測量吸光度值可選擇600nm的參比濾光片，以空氣為空白，必需