1、雞場抗體檢測與解讀 抗體檢測周報血凝（HA）和血凝(HI)抑制試驗-以新城疫為例血凝試驗（HA），目的：滴定病毒的血凝效價；原理：某些病毒或病毒的血凝素能選擇性地使某種動物的紅細胞發(fā)生凝集，這種凝集紅細胞的現(xiàn)象稱為血凝（HA）,也稱直接血凝反應。病毒顆粒紅細胞結果判定標準：1、：紅細胞呈細沙樣均勻鋪于孔底，即100凝集；2、：紅細胞均勻鋪于孔底，當邊緣不整齊而稍向孔底集中，即75凝集；3、 ：紅細胞形成一個環(huán)狀，四周有凝集塊，即50凝集；4、 ：紅細胞于孔底形成圓團，邊緣不夠光滑，四周稍有凝集塊，即25凝集；5、 ：紅細胞于孔底形成圓團，邊緣光滑整齊，即無凝集。以100% 凝集的病毒最大稀釋度

2、為該病毒的血凝價，即為一個凝集單位。上表看出，該新城疫病毒液的血凝價為1:32，則l:32為1個血凝單位，1:16、l:8分別為2、4個血凝單位，或將32/4=8，即1:8稀釋的病毒液為4個血凝單位。根據(jù)判定結果，吸取1毫升已稀釋的病原溶液再以8倍稀釋，即為4個血凝單位的標準抗原，以備凝血抑制試驗使用。+ + + + -血凝試驗（HA）結果判定血凝抑制試驗（HI），目的，確定抗體水平；原理：當在病毒的懸液中加入特異性抗體，且這種抗體的量足以抑制病毒顆?；蚱溲貢r，則紅細胞表面的受體就不能與病毒顆?；蜓刂苯咏佑|。這時紅細胞的凝集現(xiàn)象就被抑制，稱為紅細胞凝集抑制（HI）反應，也稱血凝抑制反應

3、。I am late！抗體抗原1、在血凝板上112孔內各加入50ul生理鹽水；2、在第1孔內加入被檢血清50ul，然后倍比稀釋至第11孔，最后棄50ul；3、第112孔內加入4個單位血凝抗原50ul（第12孔為病毒對照）；4、每孔加入1雞紅細胞懸液50ul；5、輕輕振蕩均勻，后放于室溫或37中靜置30分鐘6、結果判定血凝抑制試驗步驟7血凝抑制試驗（HI）結果判定結果判定標準同血凝試驗（HA）。將反應板傾斜成45度角，沉于管底的細細胞沿著傾斜面向下呈線狀流動者為沉淀，表明紅細胞未被或不完全被病毒凝集；如果孔底的紅細胞鋪平孔底，凝成均勻薄層，傾斜后紅細胞不流動，說明紅細胞被病毒所凝集。能將4單位病毒物質凝集紅細胞的作用完全抑制的血清最高稀釋倍數(shù)，稱為該血清的紅細胞凝集抑制效價，用被檢血清的稀釋倍數(shù)或以2為底的對數(shù)(10g2)表示。如上例，該血清的紅細胞凝集抑制效價為1：4或HI效價為2(10g2)。如上表所示：MAX為多個樣品中的HI抗體滴度最大值；MIX為HI抗體滴度最小值；GMT為多個樣品的HI幾何平均滴度；CV%為變異系數(shù)或離散度。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,其基本過程是將抗原或抗體吸附于同相載體，在載體上進行免疫酶反應，底物顯色后用肉眼或分光光度計判定結果。整個反應都必須在抗原結合抗體的最適條件下進行。每次試驗時都需設陽性和陰性對照。